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T-Cell 연구 서비스
T-Cell Epitope Mapping
T-cell epitope mapping 서비스는 T-cell 의 면역반응을 일으키는 항원의 epitope 부위를 찾아내 연구자에게 안내하는 서비스입니다.
항원을 수백개의 peptide 로 나눠 library 를 구성한 후 단계적으로 ELISpot (enzyme-linked immunosorbent spot) assay 를 시행합니다.
이를 통해 T-cell 에 대한 면역원성이 높은 peptide 을 선별하고 본사 분석을 바탕으로 가장 면역원성이 강한 peptide 후보를 제공해드립니다.
특장점
- 다양한 PBMC 선택 가능 - 각종 암, 감염질환, 자가면역질환 환자 및 건강인 (HLA-typed healthy)
- 다양한 cytokine 선택 가능 (IFN-γ, TNF-α, IL-2, IL-4, Granzyme B, Perforin 등)
서비스 Flow
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- 면역원성 사전 예측 및 Peptide library 생성
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- · 항원을 수백개의 overlapping peptides로 나누고 면역원성을 사전 예측
- · 선별된 면역원성 높은 peptides로 library를 구성하여 2개 이상의 premix (pool) 로 제작
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- Initial mapping
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- · 1차 ELISpot을 통해 면역원성 높은 premix를 선별
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- Fine mapping
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- · Single peptides를 이용한 2차 ELISpot을 통해 면역원성 높은 single peptides를 선별
결과 분석 예시
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- - 면역원성 사전 예측 및 두 차례의 ELISpot 을 통해 모든 peptides 에 대한 T-cell 면역반응 결과와 본사 분석 결과를 리포트로 제공
고객준비사항
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- - PBMC sample 당 항원 8 µg (10 µg/mL)
- - Cytokines 선택 (복수 선택 가능)
- - PBMC 선택 (특성 및 개수)
- - Species (human, mouse, 기타)
소요기간
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- - 8-12주
Overlapping T-Cell & B-Cell Epitope Mapping
일부 항원은 T-cell 에 결합하는 epitope 과 B-cell 에 결합하는 epitope 이 동일하기도 합니다. 앱클론은 T-cell 및 B-cell 이 동시에 인식하는 항원의 epitope 을
찾아내는 서비스를 제공하고 있습니다.
서비스 Flow
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- [B-cell epitope mapping]
PEPperCHIP® Peptide Library -
- · B-cell에 결합하는 항원의 후보 epitope peptides 선별
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- Peptide library 생성
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- · 선별된 peptides로 library 구성하여 2개 이상의 premix로 제작
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- [B-cell epitope mapping]
Initial mapping -
- · 1차 ELISpot을 통해 면역원성 높은 premix를 선별
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- Fine mapping
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- · Single peptides를 이용한 2차 ELISpot을 통해 면역원성 높은 single peptides를 선별
결과 분석
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- - B-cell epitope mapping 을 위한 PEPperCHIP® Peptide Library 와 T-cell epitope mapping 을 위한 ELISpot 결과, 그리고 본사 분석 결과를 리포트로 제공
고객준비사항
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- - PBMC sample 당 항원 8 µg (10 µg/mL)
- - Cytokines 선택 (복수 선택 가능)
- - PBMC 선택 (특성 및 개수)
- - Species (human, mouse, 기타)
소요기간
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- - B-cell epitope mapping 6-8주
- - T-Cell Epitope Mapping 8-12주
T-Cell Immune Monitoring
앱클론은 항원이 T-cell 을 활성화시켜 면역반응을 일으키는지 확인하고 T-cell 면역 반응의 활성도를 평가하는 서비스를 제공하고 있습니다.
T-cell 활성화를 분석하기 위해 gold standard 방법인 ELISpot (enzyme-linked immunosorbent spot) assay 를 사용합니다.
ELISpot assay 는항원을 PBMC (peripheral blood mononuclear cell) 와 함께 배양 후 PBMC 중 활성화된 T-cell 이 분비한 cytokine 을 검출하는 방식으로서,
항원 특이적인 T-cell 을 검출하고 정량 할 수 있습니다.
특장점
- 항원으로 peptide, protein, drug 모두 가능
- 다양한 PBMC 선택 가능 - 각종 암, 감염질환, 자가면역질환 환자 및 건강인 (HLA-typed healthy)
- 다양한 cytokine 선택 가능 (IFN-γ, TNF-α, IL-2, IL-4, Granzyme B, Perforin 등)
서비스 Flow
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- 항체와 PBMC 첨가
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- · Capture antibodies (anti-cytokine)가 사전 코팅된 96 well plate에 항원 첨가
- · Well 당 일정 수의 PBMC 첨가
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- 배양 및 반응
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- · Plate를 24-72시간 동안 배양
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- 분비된 cytokines 검출
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- · Well에 detection antibodies (anti-cytokine) 첨가
- · Color change 확인하여 positive spot을 카운팅
결과 분석
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- - ELISpot을 통해 나온 항원에 대한 모든 T-cell 면역반응 결과 및 본사 분석 결과를 리포트로 제공
고객준비사항
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- - PBMC sample 당 항원 4 µg (10 µg/mL)
- - Cytokines 선택 (복수 선택 가능)
- - PBMC 선택 (특성 및 개수)
- - Species (human, mouse, 기타)
소요기간
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- - 2-3주
적용 분야
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- - 약물 개발 시 약물 면역원성 확인
- - Memory T-cell 통한 백신 개발 모니터링
- - 자가면역질환자, 이식수혜자의 면역반응 확인
